Tiêu chuẩn ngành 28TCN 199:2004 Salmonella trong sản phẩm thuỷ sản

Tiêu chuẩn ngành 28TCN 199:2004: Phương pháp xác định Salmonella trong thuỷ sản bằng kỹ thuật PCR

Tiêu chuẩn ngành 28TCN 199:2004 được ban hành để quy định phương pháp định tính Salmonella trong sản phẩm thủy sản bằng kỹ thuật Polymerase Chain Reaction (PCR). Văn bản này nhằm đảm bảo an toàn thực phẩm và bảo vệ sức khỏe người tiêu dùng thông qua việc xác định sự hiện diện của vi khuẩn Salmonella trong các sản phẩm thủy sản.

Về nguyên tắc, phương pháp định tính này dựa vào việc xác định sự hiện diện của một đoạn ADN đích đặc trưng cho Salmonella. Quá trình thực hiện bao gồm lấy mẫu, khuếch đại ADN và điện di sản phẩm khuếch đại để phát hiện. Đặc biệt, đoạn ADN được khuếch đại có kích thước 520 bp, cho phép phân biệt giữa mẫu dương tính và âm tính với Salmonella.

Về thiết bị và hóa chất, tiêu chuẩn yêu cầu sử dụng một số dụng cụ đặc thù như tủ ấm 37°C, máy luân nhiệt, và thiết bị điện di với điện thế từ 80 đến 150 volt. Hóa chất sử dụng bao gồm các loại mồi đặc trưng invA1 và invA2, cùng với dung dịch và môi trường nuôi cấy cần thiết cho quá trình PCR.

Quy trình thực hiện bắt đầu bằng việc cân 25 g mẫu sản phẩm thủy sản, sau đó cho vào môi trường tăng sinh. Mẫu được ủ ở nhiệt độ 37°C trong khoảng 18 giờ để thu nhận Salmonella. Sau đó, quá trình giải phóng ADN diễn ra thông qua lắc và ly tâm mẫu, cuối cùng là khuếch đại ADN.

Kết quả được xác định qua phương pháp điện di gel agarose. Nếu sản phẩm khuếch đại có kích thước 520 bp, mẫu được coi là dương tính với Salmonella. Ngược lại, nếu không có sản phẩm hoặc sản phẩm không đạt kích thước yêu cầu, mẫu sẽ được kết luận âm tính.

Ngoài ra, tiêu chuẩn cũng đề cập đến quy định về an toàn trong quá trình thực hiện, bao gồm việc sử dụng găng tay và kính bảo hộ khi làm việc với chất nhuộm etyl bromua, qui định về việc sử dụng thiết bị trong phòng thí nghiệm để đảm bảo kết quả chính xác và an toàn.

Tiêu chuẩn này không chỉ có ý nghĩa quan trọng trong việc quản lý an toàn thực phẩm, mà còn ảnh hưởng trực tiếp đến sức khỏe cộng đồng và các hoạt động sản xuất, kinh doanh trong lĩnh vực thủy sản.