Tiêu chuẩn TCVN 14390:2025 Phân bón - Định lượng Bacillus coagulans bằng kỹ thuật đếm khuẩn lạc và khẳng định bằng PCR

Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 14390:2025: Quy định về định lượng Bacillus coagulans trong phân bón

Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 14390:2025 về phương pháp định lượng Bacillus coagulans được ban hành bởi Bộ Khoa học và Công nghệ vào ngày 01/01/2025, có hiệu lực thi hành từ ngày 01/03/2025. Tiêu chuẩn này thiết lập quy trình chuẩn về việc xác định số lượng vi khuẩn Bacillus coagulans trong các sản phẩm phân bón thông qua kỹ thuật đếm khuẩn lạc và xác nhận bằng phương pháp PCR.

Tiêu chuẩn chỉ áp dụng cho việc định lượng Bacillus coagulans trong phân bón vi sinh, cho phép các cơ sở sản xuất phân bón thực hiện các phương pháp thử nghiệm cần thiết để đảm bảo chất lượng sản phẩm. Cụ thể, tiêu chuẩn yêu cầu sử dụng kỹ thuật đếm số khuẩn lạc trên môi trường thạch bổ sung kháng sinh và tiến hành xác nhận bằng phản ứng chuỗi polymerase (PCR) để xác định sự hiện diện của hai gen đặc hiệu marC và comK.

Trong phần nguyên tắc của tiêu chuẩn, việc định lượng Bacillus coagulans dựa vào kỹ thuật đếm khuẩn lạc phát triển trên môi trường thạch MRS tự nhiên được bổ sung với 0,5% CaCO3, nhằm tạo điều kiện cho sự sinh trưởng và định danh vi khuẩn này. Ngoài ra, các yêu cầu về môi trường, hóa chất và dụng cụ cũng được qui định rõ ràng để đảm bảo tính chính xác của kết quả thử nghiệm.

Tiêu chuẩn cũng đặc biệt nhấn mạnh vào việc sử dụng các hóa chất tinh khiết theo khuyến cáo từ nhà sản xuất và tuân theo các tiêu chuẩn quốc gia về vi sinh vật. Quy trình thu thập mẫu và pha loãng mẫu thử cũng được mô tả chi tiết để đảm bảo độ đại diện của mẫu.

Căn cứ vào tiêu chuẩn, khi thực hiện phân tích, các phòng thí nghiệm cần sử dụng thiết bị và dụng cụ chuẩn có khả năng khử trùng cao, đồng thời thực hiện thử nghiệm với các điều kiện nhiệt độ và thời gian chính xác. Điều này đảm bảo rằng số liệu thu được là đáng tin cậy và có thể được sử dụng để đánh giá chất lượng phân bón vi sinh sử dụng Bacillus coagulans.

Kết quả thử nghiệm về số lượng Bacillus coagulans được biểu thị dưới dạng đơn vị hình thành khuẩn lạc (CFU/g) hoặc (CFU/mL) tùy thuộc vào dạng mẫu. Cách tính số lượng khuẩn lạc tương ứng cũng được hướng dẫn rõ ràng trong tiêu chuẩn để nhà sản xuất có thể kiểm tra và công nhận kết quả một cách chính xác.

Tiêu chuẩn này đã thay thế các quy định cũ không còn phù hợp, làm rõ hơn về phạm vi và quy trình cho việc thử nghiệm Bacillus coagulans trong lĩnh vực phân bón, đồng thời hỗ trợ các cơ sở sản xuất và quản lý về mặt chất lượng và an toàn sản phẩm.