Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 14262:2024 Phân bón - Định lượng Lactobacillus plantarum/Lactobacillus acidophilus bằng kỹ thuật đếm khuẩn lạc và real-time PCR

Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 14262:2024 về định lượng Lactobacillus trong phân bón

Ngày 31/12/2024, Bộ Khoa học và Công nghệ đã công bố Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 14262:2024 về "Phân bón - Định lượng Lactobacillus plantarum/Lactobacillus acidophilus bằng kỹ thuật đếm khuẩn lạc và real-time PCR". Tiêu chuẩn này sẽ có hiệu lực ngay sau khi công bố.

Tiêu chuẩn này quy định phương pháp định lượng hai loại vi khuẩn Lactobacillus plantarum và Lactobacillus acidophilus có trong phân bón và nguyên liệu sản xuất phân bón. Phương pháp sử dụng là đếm khuẩn lạc và kỹ thuật real-time PCR nhằm xác định chính xác số lượng của các vi khuẩn này.

Phạm vi áp dụng
Tiêu chuẩn quy định cách thức kiểm tra, xác định và định lượng Lactobacillus trong các mẫu phân bón vi sinh nhằm đảm bảo chất lượng sản phẩm trước khi đưa ra thị trường.

Phương pháp định lượng
Phương pháp thực hiện bao gồm:

• Đếm số lượng khuẩn lạc L. plantarum và L. acidophilus giả định qua đĩa thạch mMRS - BPB và nhuộm Gram.
• Sử dụng kỹ thuật real-time PCR để xác định chắc chắn khuẩn lạc L. plantarum và L. acidophilus.

Thiết bị và dụng cụ cần thiết
Một số thiết bị yêu cầu bao gồm tủ cấy vô trùng, nồi hấp áp lực, máy trộn mẫu, máy chu trình nhiệt thực hiện real-time PCR, và kính hiển vi. Các dụng cụ cần thiết khác bao gồm ống ly tâm, que cấy vi sinh, đĩa Petri và dụng cụ ly tâm.

Môi trường và hóa chất sử dụng
Mẫu chuẩn, môi trường nuôi cấy và thuốc thử cần tuân thủ theo các tiêu chuẩn hiện hành, đảm bảo độ tinh khiết và chất lượng trong quá trình thực hiện.

Cách tiến hành thử nghiệm
Quá trình thử nghiệm bao gồm việc pha loãng mẫu, cấy trải trên đĩa thạch mMRS - BPB và theo dõi sự phát triển của khuẩn lạc. Khuẩn lạc nghi ngờ sẽ được xác định và tiến hành tách chiết ADN để phục vụ cho quy trình PCR nhằm phân tích và xác định các vi khuẩn.

Kết quả và báo cáo thử nghiệm
Kết quả định lượng phải được làm tròn đến một chữ số sau dấu phẩy, và biểu thị dưới dạng CFU trên mililit hoặc gam. Báo cáo thử nghiệm cần bao gồm thông tin chi tiết về mẫu, phương pháp lấy mẫu, kết quả thử nghiệm và các thông số không quy định khác nếu có.

Tiêu chuẩn này là cơ sở quan trọng trong việc kiểm tra chất lượng sản phẩm phân bón có sử dụng vi khuẩn Lactobacillus, nhằm nâng cao hiệu quả sản xuất nông nghiệp và bảo vệ môi trường.