Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 14172:2024 Phân bón - Phương pháp định lượng Streptomyces lydicus - Kỹ thuật đếm khuẩn lạc

Phương pháp định lượng Streptomyces lydicus trong phân bón

Ngày 11/10/2024, Bộ Khoa học và Công nghệ đã công bố Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 14172:2024 quy định về phương pháp định lượng vi sinh vật Streptomyces lydicus trong phân bón, có hiệu lực ngay sau ngày ban hành. Tiêu chuẩn này được Trường Đại học Khoa học Tự nhiên biên soạn và Tổng cục Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng Quốc gia thẩm định.

Tiêu chuẩn áp dụng cho việc xác định số lượng S. lydicus trong phân bón và nguyên liệu sản xuất phân bón thông qua kỹ thuật đếm khuẩn lạc.

Phương pháp định lượng và thiết bị cần thiết

Tiêu chuẩn sử dụng phương pháp đếm khuẩn lạc trên môi trường nuôi cấy ISP4 và kỹ thuật real-time PCR để khẳng định sự hiện diện của S. lydicus. Cần trang bị các thiết bị như tủ cấy vô trùng, nồi hấp áp lực, máy chu trình nhiệt (real-time PCR), máy ly tâm và kính hiển vi quang học.

Môi trường nuôi cấy và thuốc thử

Môi trường nuôi cấy vi sinh Streptomyces được chuẩn bị theo tiêu chuẩn, bao gồm tinh bột, các muối khoáng cần thiết và agar, với điều kiện pH từ 7.0 đến 7.4. Các thuốc thử phục vụ cho quy trình PCR phải tuân theo chỉ dẫn của nhà sản xuất, cùng với việc đảm bảo các phản ứng không bị nhiễm chéo.

Lấy mẫu và chuẩn bị mẫu thử

Mẫu phân bón được lấy mẫu theo quy định và bảo quản đúng cách trước khi thử nghiệm. Đối với mẫu dạng rắn, cần phải nghiền và pha loãng bằng dung dịch muối NaCl 0.85% để đạt nồng độ cần thiết cho việc định lượng.

Quy trình thực hiện và phân tích kết quả

Quy trình thực hiện cấy mẫu trên đĩa thạch và theo dõi sự phát triển của khuẩn lạc S. lydicus. Sau khi có khuẩn lạc, cần thực hiện phép thử khẳng định bằng phương pháp real-time PCR. Kết quả được tính toán dựa trên số lượng khuẩn lạc đúng và tỷ lệ phần trăm khuẩn lạc được xác nhận.

Báo cáo thử nghiệm

Kết quả thử nghiệm cần được ghi chép đầy đủ, bao gồm thông tin mẫu, phương pháp thử nghiệm, cũng như các kết quả đạt được. Bảng phân tích cuối cùng sẽ thể hiện số lượng CFU S. lydicus trong mẫu thử.

Thông qua Tiêu chuẩn này, việc định lượng S. lydicus trong phân bón sẽ giúp nâng cao chất lượng và hiệu quả của sản phẩm phân bón vi sinh, góp phần bảo vệ môi trường và nâng cao năng suất cây trồng.